基本信息

產(chǎn)品名稱： HFL1細(xì)胞;人胚肺成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品編號(hào)： CL0455

細(xì)胞數(shù)量： 1*10^6

組織來(lái)源： 肺

細(xì)胞種屬： 人源

生長(zhǎng)特性： 貼壁

培養(yǎng)基： F-12K

形態(tài)特征： 成纖維細(xì)胞

傳代方法： 每周2-3次更換新鮮培養(yǎng)基，按1:4至1:6的比例傳代培養(yǎng)。

培養(yǎng)條件： 胎牛血清至終濃度為10％。環(huán)境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃

細(xì)胞描述： 源自高加索人胎兒

細(xì)胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）

細(xì)胞運(yùn)輸： 干冰運(yùn)輸（2ml凍存管）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T25瓶）

注意事項(xiàng)

凍存細(xì)胞接收后的處理：

1.干冰運(yùn)輸，收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇；
2.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請(qǐng)立即拍照后與我們聯(lián)系。

復(fù)蘇細(xì)胞接收后的處理：

1.收到細(xì)胞后，請(qǐng)首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請(qǐng)立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細(xì)胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當(dāng)天不要消化處理，如果細(xì)胞長(zhǎng)滿90%，可選擇傳代處理。
4.如您收到細(xì)胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問(wèn)題，出現(xiàn)的細(xì)胞問(wèn)題將不提供免費(fèi)重發(fā)服務(wù)。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

友情提示：僅供科研實(shí)驗(yàn)，不得用于臨床。 

         運(yùn)輸：快遞送貨上門，運(yùn)輸保存條件苛刻產(chǎn)品可單獨(dú)送貨上門。 

         承諾：1·因產(chǎn)品質(zhì)量造成的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確可全額退款。 

      2·貨物運(yùn)輸包裝均按運(yùn)輸說(shuō)明嚴(yán)格執(zhí)行，杜絕運(yùn)輸途中溫度變化對(duì)產(chǎn)品品質(zhì)影響。 

      3·對(duì)于代測(cè)客戶標(biāo)本較多時(shí)均可提供上門取樣服務(wù)。 

      4·代測(cè)所需資料在七日內(nèi)以報(bào)告的形式發(fā)送客戶手中。  

      5·所有客戶購(gòu)買價(jià)格均批發(fā)價(jià)，如發(fā)現(xiàn)價(jià)格不同全額退還差價(jià)。 

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