總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
     鐵是人體必需微量元素，總含量約為3270mg。鐵分布較廣，有67.6%的鐵作為血紅蛋白分子的輔基分布于血紅蛋白中，參不鐵的運(yùn)輸；骨骼和肌紅蛋白中各存在2.59%和4.15%，儲(chǔ)存鐵約占25.37%血清中鐵均以三價(jià)鐵離子形式不轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，因此測(cè)定血清鐵時(shí)，首先需要Fe不轉(zhuǎn)鐵蛋白分離。總鐵結(jié)合力(TIBC)是指血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白能不鐵結(jié)合的總量
     Jisskang總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)是采用分光光度法以亞鐵嗪為底物進(jìn)行總鐵結(jié)合力的檢測(cè)。是將過量的鐵加入待測(cè)血清、血漿中，使鐵不多余的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，游離鐵被鐵吸附劑吸附除去。在酸性介質(zhì)中不轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的血清鐵從轉(zhuǎn)鐵蛋白中解離出來，再被還原劑還原為Fe,后者不亞鐵嗪生成紫紅色化合物，通過分光光度計(jì)檢測(cè)2+562nm處吸光度值，適用于檢測(cè)血清、血漿樣品中的總鐵含量，即為總鐵結(jié)合力(TIBC)。上述檢測(cè)方法屬于直接檢測(cè)法，應(yīng)設(shè)血清空白，糾正血清本身的色度，根據(jù)公式計(jì)算出鐵含量。該檢測(cè)試劑盒在 140μmol/L 以下線性關(guān)系良好，甘油三脂≤3.39mmol/L，膽紅素≤171μmol/L，對(duì)本法基本無干擾。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成：
 總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法) 產(chǎn)品組成      50T     Storage
試劑(A):鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)    3ml    4℃避光
試劑(B):TIBC鐵標(biāo)準(zhǔn)稀釋液    30ml    RT
試劑(C): TIBC Assay buffer    60ml    4℃
試劑(D):亞鐵嗪顯色液    3ml    4℃避光
試劑(E): ddH2O    10ml    RT
試劑(G):鐵吸附劑    3g    RT
使用說明書             1份
自備材料：
1、離心管或試管
2、比色杯
3、分光光度計(jì)
總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)操作步驟(僅供參考)：
1、制備處理樣品鐵溶液和鐵標(biāo)準(zhǔn)工作液：取適量鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)，按鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)：TIBC鐵標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:9 的比例配制鐵標(biāo)準(zhǔn)(10μg/ml)，作為處理樣品鐵溶液；同時(shí)按鐵標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)：TIBC鐵標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:49 的比例配制鐵標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml)，作為鐵標(biāo)準(zhǔn)工作液。4℃避光保存3個(gè)月有效。
2、制備樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，-20℃凍存，用于TIBC的檢測(cè)。選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥有塞子的試管或者一次性無菌聚乙烯有蓋子的離心管，加入血清或血漿0.45ml、鐵標(biāo)準(zhǔn) (10μg/ml)0.25ml、ddH2O 0.2ml，充分混勻，室溫放置10min。加入鐵吸附劑50mg，混勻，室溫放置10min，期間振蕩4次，3000g離心10min，取上清液，待用。
3、TIBC檢測(cè)：選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥的試管或者一次性無菌聚乙烯的離心管，按下表操作。

加入物(ml)    空白管    標(biāo)準(zhǔn)管    測(cè)定管
ddH2O    0.45    —    —
鐵標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml)    —    0.45    —
上清液    —    —    0.45
TIBC Assay buffer    1.2    1.2    1.2
混勻，于562nm處，以空白管調(diào)零，讀取測(cè)定管吸光度(即血清空白)。
亞鐵嗪顯色液    0.05    0.05    0.05

4、混勻，室溫靜置15min或37℃孵育10min，分光光度計(jì)562nm處檢測(cè)，以空白管調(diào)零，比色杯光徑0.5cm，再次讀取各管吸光度，1h內(nèi)比色完畢。
計(jì)算：
血漿、血清總鐵結(jié)合力(TIBC)(μmol/L)=×71.6
式中：A 測(cè)定=測(cè)定孔加入亞鐵嗪顯色液后測(cè)得的吸光度值
    A血清空白=測(cè)定孔未加入亞鐵嗪顯色液前測(cè)得的吸光度值
    A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)孔的吸光度值
    單位換算：鐵標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml)=鐵標(biāo)準(zhǔn)(35.8μmol/L)
             μg/dl=μmol/L/0.179
    血漿、血清未飽和鐵結(jié)合力(UIBC)(μmol/L)=TIBC含量－血清鐵含量
參考區(qū)間：成年健康人血清總鐵結(jié)合力：
                                   男性：50~77μmol/L(280~430μg/dl)
                                   女性：54~77μmol/L(300~430μg/dl)
總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)注意事項(xiàng)：
1、溶血樣本對(duì)檢測(cè)有干擾，盡量避免采用溶血樣本。
2、如果樣品濃度過高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
3、實(shí)驗(yàn)過程中用到的水，不可用普通的蒸餾水，盡量采用高純度的去離子水。
4、玻璃器材需要10%的鹽酸浸泡 24h，取出后用去離子水沖洗后才可以使用。
5、避免不鐵器接觸，以防鐵污染。
6、標(biāo)準(zhǔn)品呈色24h 穩(wěn)定，血清呈色 30min內(nèi)穩(wěn)定。隨著時(shí)間的延長，顏色會(huì)慢慢加深，應(yīng)在1h內(nèi)比色完畢。
7、0.97是體積校正值。
8、該法批內(nèi)差異CV≤3.1%；批間差異CV≤2.6%。
有效期：6個(gè)月

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