使用培養(yǎng)基做植物細(xì)胞組織培養(yǎng)條件選擇介紹

一 光照

光照強(qiáng)度對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的增殖和器官的分化有重要的影響,一般來說,光照強(qiáng)度較強(qiáng),而光照強(qiáng)度較弱幼苗容易圖長(zhǎng).離體培養(yǎng)條件下常用蓋得光亮,一般為1000-4000勒克斯.離體培養(yǎng)中通常難達(dá)到4000勒克斯,一般光亮在2-3000勒克斯.光照強(qiáng)度的高低直接影響器官的分化頻率,高光亮可以降低植物體內(nèi)生長(zhǎng)素水平,低光亮使植物體內(nèi)生長(zhǎng)素水平較高,這個(gè)情況下容易生根.例如煙草和可可的體胚發(fā)生需要高強(qiáng)度的光照:龍巖的體胚發(fā)生需要需要黑暗條件,光照會(huì)嚴(yán)重抑制其發(fā)生,

光質(zhì)對(duì)愈傷組織誘導(dǎo),培養(yǎng)組織的增殖以及器官的分化都有明顯的影響.對(duì)苗再生zui有利的光譜是藍(lán)光區(qū),根的發(fā)生則是紅光區(qū).如在煙草髓部組織分化秒的培養(yǎng)中,起作用的主要是藍(lán)光區(qū),連接黑暗下,培養(yǎng)物停留在芽的分化,不能成苗:紅光能促進(jìn)菊芋塊莖組織形成根;煙草花粉培養(yǎng)中,紅光和低光強(qiáng)的白光效果;但曼陀羅花藥培養(yǎng)中,紅光則抑制胚狀體形成.離體培養(yǎng)條件下,一般用日光燈進(jìn)行光照,光譜成分組要是藍(lán)紫光,波長(zhǎng)在419-467nm對(duì)芽分化有效光譜成分為藍(lán)紫光,根分化則受600-680nm所刺激.

光周期對(duì)植物細(xì)胞有脫分化和再分化的效應(yīng).離體培養(yǎng)中光周期的調(diào)節(jié)zui常用16小時(shí)光照,8小時(shí)黑暗,愈傷組織誘導(dǎo)節(jié)段,一般采用三種做法:全暗,周期性光照和散射型光照.依照植物種類不同,做法不同,大多數(shù)植物適合全暗或周期性光照.在器官發(fā)生階段,一般給予周期性光照比較好

二 溫度

大多數(shù)植物細(xì)胞培養(yǎng)都在23-27度之間進(jìn)行,一般采用25正負(fù)2度環(huán)境.低于15度培養(yǎng)時(shí),植物細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)為生長(zhǎng)停止,高于35度時(shí)對(duì)植物生長(zhǎng)不利.但是,不同植物培養(yǎng)的室溫不同.溫度不經(jīng)影響植物細(xì)胞培養(yǎng)育苗的生長(zhǎng)速度,也影響其分化增殖以及器官建成等發(fā)育進(jìn)程.

三 濕度

冬季應(yīng)減少瓊脂的用量,否則將影響培養(yǎng)基感應(yīng).以致不利于外植體接觸或插進(jìn)培養(yǎng)基,導(dǎo)致生長(zhǎng)受阻.封口材料也直接影響容器內(nèi)濕度的情況,但封閉性較高的封口材料榮引起透氣性受阻,導(dǎo)致植物生長(zhǎng)發(fā)育受影響.環(huán)境的相對(duì)濕度可以影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā),一般要求70-80%的相對(duì)濕度,常用加濕器或經(jīng)常灑水的方法來調(diào)節(jié)濕度.濕度過低會(huì)使培養(yǎng)基喪失大量水分,導(dǎo)致培養(yǎng)基成分濃度的改變和滲透壓的升高,進(jìn)而影響組織培養(yǎng)的正常進(jìn)行.濕度過高棉塞容易長(zhǎng)霉造成污染.

四 PH值

不同的植物對(duì)培養(yǎng)基的PH值要求不同,大多在5-6.5左右,一般培養(yǎng)基為5,8.一般來說PH高于6.5時(shí),培養(yǎng)基會(huì)變硬;培養(yǎng)基低于5時(shí),瓊脂不能很好的凝固.在高溫滅菌時(shí)會(huì)降低PH大約在0.2-0.3.因此配制時(shí)一般要求高處0.2-0.3個(gè)單位.

五 滲透壓

培養(yǎng)基中有鹽類,蔗糖等化合物,因而影響滲透壓的變化.通常1-2個(gè)大氣壓對(duì)植物生長(zhǎng)有促進(jìn)作用,2個(gè)大氣壓以上對(duì)生長(zhǎng)有阻礙作用,5-6個(gè)大氣壓會(huì)使植物組織停止生長(zhǎng),6個(gè)以上大氣壓細(xì)胞不能生存.甘露醇,山梨醇可以作為調(diào)節(jié)物質(zhì).

六 氣體

植物組織培養(yǎng)氧氣是必須的因素,瓶蓋附有濾氣膜的封口材料,固體培養(yǎng)基可加入活性炭來增加通氣度,以利于發(fā)根.培養(yǎng)室應(yīng)經(jīng)常換氣,改善培養(yǎng)室的通氣狀況.

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