注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

規(guī)格: 50T/24S

產品內容：

試劑一：甲苯 10mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×1 瓶，臨用前加入 20mL 蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存； 試劑三：液體 65mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四 A 液：液體 2mL×1 瓶，4℃保存；

可見分光光度法

試劑四 B 液：液體 8mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將 A液倒入 B 液中混合，待用；未用完的液體

4℃保存一周。

試劑五：液體 10mL×1 瓶，4℃保存；

標準品：液體 1mL×1 支， 1mg/mL 氮標準液

產品說明：

S-UE 能夠水解尿素，產生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數量、有機物質含量、全氮和速效氮含量呈正相關。土壤脲酶活性反應了土壤的氮素狀況。

本法以尿素為基質，利用靛酚藍比色法測定脲酶水解尿素產生的 NH3-N，生成的藍色靛酚和氨的濃度成正比。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：

1、分光光度計預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 630nm，蒸餾水調零

2、培養(yǎng)

混勻，放入 37℃水浴培養(yǎng) 24h 后，10000g 常溫離心 10min，取上清液。

2、將培養(yǎng)結束的上清液稀釋 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸餾水）若吸光值仍大于 1.5 繼續(xù)稀釋。

3、標準品的準備：吸取適量的標準溶液，稀釋至 10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。

4、測氨量

混勻，630nm 處蒸餾水調零，測 A 值，ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管設一個對照管。

標準曲線的建立：根據標準管的濃度（y）和吸光度（x,減去濃度為 0 的空白管），做標準曲線。

脲酶活力的計算：

根據標準曲線，將ΔA（x）帶入公式計算測定中樣品的濃度（μg/mL）y 值。單位的定義：每天每 g 土樣中產生 1μg NH3-N 定義為一個酶活力單位。

脲酶活力（U/g 土樣）＝y×10×V 反總÷W÷T=80×y

10：稀釋倍數；T：反應時間，1d；V 反總：反應體系總體積：2mL；W：樣本質量，0.25g。