產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

     動(dòng)物或植物細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激(oxidative stress) 時(shí)，會(huì)發(fā)生脂質(zhì)氧化，丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一種生物體脂質(zhì)氧化的天然產(chǎn)物，一些脂肪酸氧化后逐漸分解為一系列包括MDA在內(nèi)的復(fù)雜化合物，此時(shí)通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平，因此MDA的測(cè)定被廣泛用作脂質(zhì)氧化的指標(biāo)。生物體內(nèi)的一些其它生化反應(yīng)也會(huì)產(chǎn)生MDA，例如thromboxane synthase 也可以催化產(chǎn)生，但只要在測(cè)定時(shí)設(shè)置適當(dāng)對(duì)照即可觀察到脂質(zhì)氧化水平的變化。 

自備材料：

1、生理鹽水或 PBS

2、離心機(jī)、離心管或 96 孔板、光分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀、水浴鍋或恒溫箱

操作步驟(僅供參考)：

1、準(zhǔn)備樣品：

①血清、血漿、尿液、腦脊液樣品：從待測(cè)樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血，直接檢測(cè)，如超過(guò)線性范圍，用生理鹽水或 PBS 稀釋后檢測(cè)。

②組織、細(xì)胞等樣品：組織或細(xì)胞可以使用PBS或 RAPI裂解液等進(jìn)行勻漿或裂解，勻漿或裂解組織時(shí)組織重量占勻漿液或裂解液的比例應(yīng)為10%；對(duì)于細(xì)胞，每106個(gè)細(xì)胞使用 0.1ml裂解液或勻漿液，勻漿或裂解后4℃ 8000~12000g 離心10min，取上清用于后續(xù)測(cè)定。勻漿或裂解等樣品制備步驟宜在冰浴或 4℃條件下進(jìn)行操作，樣品準(zhǔn)備完畢后可以用 BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù)計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)MDA 含量。

③該試劑盒對(duì)于樣品中的常見化學(xué)成分的兼容性參考下表：

2、配制TBA 工作液：稱取適量TBA，用TBA稀釋液配制成濃度為0.68％的TBA工作液； 例如取68mgTBA用10ml TBA 稀釋液配制，最終濃度即為0.68%的TBA工作液，TBA工作液需溶解后再使用，可以加熱到 60℃促溶，并可通過(guò)反復(fù)劇烈Vortex促溶； 配制

好的TBA工作液 4℃避光保存，至少1個(gè)月內(nèi)有效。

3、稀釋系列標(biāo)準(zhǔn)品：取適量 MDA 標(biāo)準(zhǔn)品(1mmol/L)，用恰當(dāng)溶液稀釋至 1、2、5、10、20μM(如果進(jìn)行簡(jiǎn)易快速檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)品直接稀釋10μM)。注意：待測(cè)樣品為血清、血漿時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品宜用生理鹽水稀釋；待測(cè)樣品由勻漿液、裂解液、PBS 獲得時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品宜用相同溶液稀釋，其原則是保證空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管具有可比性；配制好的 MDA標(biāo)準(zhǔn)品 4℃避光保存，至少3個(gè)月內(nèi)有效。

4、配制MDA檢測(cè)工作液：臨檢測(cè)前，根據(jù)待測(cè)定的樣品數(shù)(含對(duì)照)，參考下表新鮮配制適量的MDA檢測(cè)工作液。

注意事項(xiàng)：

1、上述低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降。

2、參考取樣量：血清、血漿、尿液取0.1ml；低密度脂蛋白懸液取0.1~0.2ml；食用油取0.03ml；肝臟、心肌、肌肉等，取5%或10%勻漿 0.1~0.2ml。

3、測(cè)定樣品吸光度值較低時(shí)，可將水浴延長(zhǎng)至80min，但應(yīng)同時(shí)延長(zhǎng)，以免造成批間差異。

4、待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)置于-20℃保存，4天內(nèi)穩(wěn)定。

5、避免使用 EDTA、枸櫞酸、氟化鈉、草酸等抗凝劑。

6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

7、試劑開封后請(qǐng)盡快使用，以防影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。

有效期：12個(gè)月有效；低溫運(yùn)輸，按要求保存。