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如何使用染色試劑盒進(jìn)行樣本的染色處理

更新時(shí)間:2020-11-24點(diǎn)擊次數(shù):1112
  染色試劑盒由蘇木精染色劑和EA/OG混合染色劑組成,用于在非婦科樣本制備中,和PrepStain液基細(xì)胞自動(dòng)制片機(jī)配合使用,對(duì)臨床樣本進(jìn)行染色,以便樣本的進(jìn)一步篩查和檢測(cè)。
  樣本的染色處理:
  一、血涂片及骨髓涂片
  1、推片:取全血或骨髓3μl左右置載玻片上,將推玻片保持與載玻片30°角,置于血滴正前方,稍微往后移與血滴接觸,血滴沿推片下緣散開,再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動(dòng),至血滴鋪完血膜為止。不要太薄,以免細(xì)胞太少,也不要太厚,以免太重疊。
  2、固定:讓涂片在空氣中自然晾干,再放入本試劑盒中的固定液中固定2-3分鐘,水洗30-60秒。
  3、孵育:水洗后還未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
  4、復(fù)染:孵育完后,取出水洗1分鐘,在玻片未*干前進(jìn)行復(fù)染??捎锰K木素復(fù)染1-2分鐘,或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘,兩者任選其一即可。
  二、細(xì)胞涂片及細(xì)胞爬片
  1、固定:將細(xì)胞涂片或細(xì)胞爬片放入本試劑盒中的固定液中固定2-3分鐘,水洗30-60秒。
  2、孵育:水洗后還未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
  3、復(fù)染:孵育完后,取出水洗1分鐘,在玻片未*干前進(jìn)行復(fù)染。可用蘇木素復(fù)染1-2分鐘,或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘,兩者任選其一即可。
  三、冰凍切片
  1、回溫:將保存在-20℃冰箱中的冰凍切片放置到切片架上回溫5-10分鐘??梢苑旁?7℃孵箱中進(jìn)行回溫,或者將切片架放置在一個(gè)小盒子中,將盒子置于37℃水浴鍋中進(jìn)行回溫。
  2、水合:將回溫好的切片,水中浸泡1-2分鐘。
  3、固定:讓切片在空氣中自然晾干,再放入本試劑盒中的固定液中固定2-3分鐘,水洗30-60秒。
  4、孵育:水洗后還未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
  5、復(fù)染:孵育完后,取出水洗1分鐘,在玻片未*干前進(jìn)行復(fù)染。可用蘇木素復(fù)染1-2分鐘,或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘,兩者任選其一即可。
  四、石蠟切片
  1、脫蠟:二甲苯中脫蠟5-10分鐘。再換用新鮮的二甲苯脫蠟5-10分鐘。
  2、無(wú)水乙醇浸泡5分鐘。再分別用90%、70%乙醇各2分鐘。
  3、水合:蒸餾水中浸泡2分鐘。
  4、孵育:還未*干前放入底物孵育液中避光孵育60分鐘。太干后染色效果會(huì)變差。
  5、復(fù)染:孵育完后,取出水洗1分鐘,在玻片未*干前進(jìn)行復(fù)染??捎锰K木素復(fù)染1-2分鐘,或者用甲基綠復(fù)染2-3分鐘,兩者任選其一即可。
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