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通用型DNA1.8%瓊脂糖凝膠電泳試劑盒

更新時(shí)間:2020-07-20點(diǎn)擊次數(shù):1043

主要用途

    通用型DNA1.8%瓊脂糖凝膠電泳試劑是一種旨在使用瓊脂糖作為介質(zhì),進(jìn)行常規(guī)低分子50至1000堿基DNA 電泳的基本技術(shù)方法。產(chǎn)品即到即用,無(wú)核酶污染,性能穩(wěn)定,重復(fù)性好,簡(jiǎn)化操作,建立標(biāo)準(zhǔn)化體系。

 技術(shù)背景

       瓊脂糖(agarose)或聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacrylamide gel electrophoresis;PAGE)是分離、識(shí)別和純化核酸分子的標(biāo)準(zhǔn)方法。瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法,其兼有分子篩電泳的雙重作用。瓊脂糖凝膠約可區(qū)分相差100堿基DNA的片段,其分辨率比丙烯酰胺凝膠低,但分離范圍廣。普通瓊脂糖凝膠分離DNA的范圍為0.2-20kb,利用脈沖電泳,可分離高達(dá)107bpDNA的片段。瓊脂糖凝膠電泳濃度通常在0.52%之間,低濃度的用來(lái)進(jìn)行大片段核酸的電泳,高濃度的用來(lái)進(jìn)行小片段分析。 

 產(chǎn)品內(nèi)容

膠體液(Reagent A)   毫升

電泳液(Reagent B)        毫升

上樣液(Reagent C)

染色(Reagent D) 毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                     1

保存方式

保存在4℃冰箱里,避免光照;有效保證6

用戶自備

1.5毫升離心管:用于樣品處理

無(wú)離子水:用于染色

DNA標(biāo)準(zhǔn)樣:用于核酸電泳的片段大小的參照

電泳儀:用于電泳運(yùn)行

實(shí)驗(yàn)操作

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將冰箱里的試劑置于室溫下均衡溫度。然后進(jìn)行下列操作。

  1.  將膠體液(Reagent A)置于微波爐里加熱融化(注意:實(shí)時(shí)觀察融化狀況,避免過(guò)度融化和溢出)
  2. 即刻倒入適量的膠體液(Reagent A)到膠體制備板內(nèi),避免氣泡
  3. 插入孔梳
  4. 在室溫下孵育45分鐘,或直至膠體凝結(jié)
  5. 膠體板移入到電泳槽里
  6. 加入適量的電泳液(Reagent B)
  7. 小心拔去孔梳
  8. 移取10微升樣品至1.5毫升離心管
  9. 加入xx微升上樣液(Reagent C),混勻
  10. 加入到膠體樣品孔里
  11. 接上電源后電泳電壓為100伏運(yùn)行1小時(shí),或直至溴酚藍(lán)(Bromophenol Blue)染料前沿到達(dá)膠底前1厘米處
  12. 準(zhǔn)備200毫升用戶自備的無(wú)離子水
  13. 加入xx微升染色(Reagent D),混勻
  14. 放進(jìn)膠體,置于平式搖蕩儀上,室溫下孵育30分鐘,速度為50RPM,避免光照
  15. 在標(biāo)準(zhǔn)302nm紫外光下進(jìn)行觀察,并拍照記錄 

注意事項(xiàng)

  1. 本產(chǎn)品為10次操作
  2. 操作時(shí),須戴手套
  3. 染色(Reagent D)具有毒性,注意操作安全
  4. 使用時(shí),避免對(duì)母液的污染
  5. 電泳液(Reagent B)可以重復(fù)使用
  6. 本公司提供系列電泳分析試劑產(chǎn)品 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

  1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
  2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)核酶和蛋白酶污染
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